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生物安全柜性能测试项目与方法

发布时间:2021-01-21 17:34  

  生物安全柜性能测试项目与方法_能源/化工_工程科技_专业资料。生物安全柜性能测试项目与方法 (依据《生物安全柜应用指南—原理、使用和验证》李劲松主编,化学工业出版社) A.1 柜体泄漏检测试验——压力衰减及皂泡 示踪气体检测试验 柜体泄漏检测试验——压力衰减及

  生物安全柜性能测试项目与方法 (依据《生物安全柜应用指南—原理、使用和验证》李劲松主编,化学工业出版社) A.1 柜体泄漏检测试验——压力衰减及皂泡 示踪气体检测试验 柜体泄漏检测试验——压力衰减及皂泡/示踪气体检测试验 ——压力衰减及皂泡 A.1.1 压力衰减及皂泡试验 A.1.1.1 目的 该测试应在所有压力排风系统的外表面进行,目的是检测焊缝、密封垫、压力排风系统 检漏口以及Ⅲ级柜手套接口是否存在泄漏。 A.1.1.2 仪器 ——压力计、压.力表或压力传感系统,测量范围为 0~500Pa、精确度为±5 Pa。 ——渗漏检测试剂(25g/L 肥皂液,或其他稀释 10 倍的中性洗涤剂)。 ——塑料布(0.5mm 耐冲击性聚苯乙烯膜)。 ——管道密封胶带。 A.1.1.3 (压力衰减测试)方法 压力衰减测试) ①将安全柜密封(对于 I 级、Ⅱ级安全柜即密闭正面的观察窗和排风口) 。 ②为方便测试,必要时应除去装饰嵌板及其他通道障碍部件以暴露压力排风系统。 ③将压力计、压力表或压力传感系统连接到测试区域以指示内部压力[见图 A-1(a)] ④将安全柜充气加压至 500Pa,停止充气,并在 30min 后测量压力。允许的泄漏量为原 压力的 10%。如果安全柜的压力达到此标准,则使用皂泡法来确定泄漏位置。 A.1.1.4 (皂泡测试)方法 泡测试) ①将安全柜密封(对于 1 级、Ⅱ级安全柜即密闭正面的观察窗和排风口) 。 ②为方便测试,必要时应除去装饰嵌板及其他通道障碍部件以暴露压力排风系统。 ③将压力计、压力表或压力传感系统连接到测试区域以指示内部压力[见图 A-1(a)]。 图 A-1 生物安全柜柜体泄漏试验 ④安全柜充气加压至。 ⑤沿着安全柜压力排风系统外表面上所有的焊缝、 密封垫、 检漏口和Ⅲ级柜手套接口喷 洒或擦拭液态渗透检测试剂(25g/L 肥皂液,或其他稀释 10 倍的中性洗涤剂) 。小的泄漏点 将会形成气泡显示出来。 而较大的泄漏点则在洞口处还没有形成气泡时, 就把探测液体吹走, 而且可以感觉到气体轻微的流动或听到声音。 A.1.1.5 合格标准 安全柜应能保持在 500Pa±50Pa 的气压下 30min,或者当压力维持在 500Pa±50Pa 时,安 全柜压力排风系统外表面上所有的焊缝、密封垫、检漏口和密封处没有皂泡产生。 A.1.2 氦气泄漏测试 A.1.2.1 目的 该测试在可能受生物污染的压力排风系统中进行, 目的是检测焊接、 密封垫或密封剂密 封的连接处是否存在泄漏,这些泄漏可能使具有潜在危害的物质释放进入大气。 A.1.2.2 仪器 氦气泄漏检测器:用前应按照使用说明进行标定。 A.1.2.3 方法 ①进行测试的房间内事先应彻底排空测试气体, 并且尽可能减少空气流动。 测试区应禁 烟。 ②将安全柜密封(对于④级、Ⅱ级安全柜即密闭正面的观察窗和排风口)。 ③安全柜充气加压至 500Pa。如果 30min 后,安全柜压力变化不超过±10%,则减压至 正常。如果安全柜不能保持这一压力,则使用渗漏检测试剂检查泄漏处(见 A.1.1) ,修复后 再次进行测试。 ④氦气泄漏检测:向安全柜内充入纯氦气,直至排风口氦气浓度达 15%,然后将安全 柜加压至 500Pa。或者使用膨胀气囊在安全柜内部排出 15%的空气,在气囊向安全柜外排气 的同时将氦气注入安全柜,然后加压至 500Pa。 ⑤打开安全柜的送风机使气体循环 30s。 ⑥按照使用说明调整氦气泄漏检测器的灵敏度至 1×10-5ml/s。 ⑦沿缝隙、Ⅲ级柜手套接口、检漏口、面板密封垫以及其他可能的泄漏处移动探头。注 意不使仪器震动。 在探测表面以约 2.5cm/s 的速度移动探头, 探头与表面的距离保持在 6.3 ~ 13mm 之间[见图 A-1(b)]。 A.1.2.4 合格标准 氦气泄漏测试) 合格标准(氦气泄漏测试 氦气泄漏测试 当以 15%以土的氦气浓度加压至 500Pa 时,安全柜任意位置的泄漏率不得超过 1x10-5ml/s。 注意:①检测的灵敏度,保持正压在整个柜体为 103ml/s,肥皂水法每一处为 10-2ml/s, 卤素漏泄试验整个柜体为 10-5ml/s。 ②保持正压操作的关键是前面开口的密闭。只要密闭完全,操作很简单。但出现漏时,网赚 确定漏泄点比较困难。 ③肥皂水法在密闭操作不完美时也可进行, 但需要柜内能持续保持一定压力。 大的泄漏 点因不易形成肥皂泡反而会被疏忽,要充分注意这一点。 A.1.3 六氟化硫( 六氟化硫(SF6)泄漏测试 ) A.1.3.1 目的 该测试在可能受生物污染的压力排风系统中进行, 目的是检测焊接、 密封垫或密封剂密 封的连接处是否存在泄漏,这些泄漏可能使具有潜在危害的物质释放进入大气。 A.1.3.2 仪器 工业型 SF6 泄漏检测器(或灵敏度 1×10-7ml/s 的卤化物检测仪),使用前需按照使用说明 校准。 A.1.3.3 方法 ①进行测试的房间内事先应彻底排空测试气体,并.且尽可能减少空气流动。测试区应 禁烟。 ②将安全柜密封(即密闭正面的观察窗和排风口) 。 ③安全柜充气加压至 500Pa。如果 30min 后,安全柜压力变化不超过±10%,则减压至 正常。如果安全柜不能保持这一压力,则使用渗漏检测试剂检查泄漏处(见 A.1.1,修复后再 次进行测试。 ④向安全柜内充入 SF6 气体,加压至 500Pa。 ⑤打开安全柜的送风机使气体循环 30s。 ⑥按照使用说明调整 SF6 泄漏检测器的灵敏度至 5×10-7ml/s。 ⑦沿缝隙、连接处、检漏口、面板密封垫以及其他可能的泄漏处移动探头。注意不使仪 器震动。 在探测表面以约 2.5cm/s 的速度移动探头, 探头与表面的距离保持在 6.3~13mm 之 间[见图 A-1(b)]。 A.1.3.4 合格标准(SF6 泄漏检测) 合格标准( 泄漏检测) 安全柜任意位点的泄漏速率不得超过 5×10-7ml/s。 A.2 高效空气粒子(HEPA)过滤器泄漏检测 高效空气粒子( 气粒子 ) A.2.1 目的 检测下排送风 HEPA 过滤器和排风 HEPA 过滤器本身、 过滤器外壳以及过滤器固定框架 的完整性。检测时安全柜以额定风速±0.025m/s 运行。 A.2.2 仪器 A.2.2.1 线性或对数刻度显示的气溶胶光度计。 线性或对数刻度显示的气溶胶光度计。 对于滤器上游平均粒径 0.3 ?m, 浓度为 10?g/L 的多分散性邻苯二甲酸二辛酚(DOP)气溶胶颗粒,能够 100%显示。灵敏度为 1×10-3?g/L, 采样流量 5×10-4m3/s±10%以上, 喷雾口面积在 11cm2 以下。 光度计使用前应按照说明进行标 定。 A.2.2.2 气溶胶发生器。气喷式,产生粒子的平均粒径 0.3?m。 A.2.2.3 压力表。量程 0~550kPa,分辨率 7kPa,使用前按照说明进行校准。 A.2.3 检刚方法及合格标准 A.2.3.1 适于扫描操作的过滤器 ①如果安全柜装有过滤扩散器和保护外罩,监测前应移除。打开安全柜的风机和照明, 按照使用说明安放气溶胶发生器, 井将气溶胶通过有螺纹插塞的贯穿物向被测生物安全柜的 远离过滤器的静压箱内引入。气溶胶的引入点应按照适于与柜内气流均匀混合的原则确定。 可在气溶胶发生器的出口安装一个 T 形接头,以使检测气溶胶分布到单一风机的多个入口 之内或多个风机的入口之内。 ②按照使用说明启动并调整气溶胶光度计。 ③在上游临近过滤器处测量气溶胶浓度,测点最少为 3 点,分别为中心 1 点,距两边 50mm 处各一点,样品浓度应大于 10?g/L。 ——线。 ——对于对数刻度光度计,将过滤器上游侧浓度调整至一个分刻度所代表浓度的 10000 倍(采用仪器校准曲线) 。 ④在 HEPA 过滤器的整个下游面以及每个过滤器接缝的四周用光度计作扫描检漏。 过滤 器的四周边缘必须单独扫过, 过滤器滤材与边框之间要沿着接缝扫描, 过滤器与安全柜之间 要围绕密封部位扫描。探头与检测面距离保持在 2.5cmn 以内,扫描速度小于 5cm/s, ,线路 应重叠。 ⑤任何点上气溶胶的持续渗透不得超过上游浓度的 0.01%。 A.2.3.2 不适于扫描操作的过滤器 如果安全柜的管道连接不适于对排风过滤器进行扫描操作, 就在过滤器下游的通风管的 某一位置钻一个直径大约为 1cm(0.3in)的孔,开孔的位置要宜于气溶胶与柜内空气均匀混 合,然后用刚性伸缩管将光度计的采样探头插入小孔中来进行泄漏试验。 气溶胶的持续渗透不得超过上游浓度的 0.005%。 注意:①排风高效空气粒子过滤器也可用下述方法检漏。只开排风机,不开送风机,使 生物安全柜吸入普通环境空气,含尘浓度不低于 100000 粒/L(≥0.5?m) 。用粒子计数器的采 样口在排风高效过滤器出风面和边框缝隙处之上 20 处,做扫描检漏,扫描移动速度 ≤5~20mm/s,路线应重叠。 合格标准为④级、Ⅱ级和Ⅲ级柜第一级排风滤器≤3 粒/L,Ⅲ级柜第二级排风滤器≤1 粒 /L。除④级柜外其他型号的安全柜送风滤器均应达到≤3 粒/L。 ②检测管的直径和流量对检测灵敏度影响很大。 扫描试验的最佳条件是等速吸风。 流量 一般设定为 5×10-4m3/s,检测口的直径最好是 25mm。 ③DOP 具有微弱致癌性。 它的替代品, 例如聚 α 一烯烃 (polyalpha olefin, PAO) 二 , (2— 乙基己基)癸二酸酯[di(2-ethylhexyl)sebacate]、聚乙二醇以及药用级轻质矿物油,虽然气溶 胶数据齐全,但尚不能保证安全可靠,因此目前仍采用 DOP。 A.3 噪声水平测试 A.3.1 目的 测量安全柜的机械噪声水平, 有助于设法减少操作人员的疲劳。 检测可在普通房间里进 行。 A.3.2 仪器 声测仪,精度为±1dB,分辨率为 1dB,最小范围为 50~100dB,应按使用说明将加权值 设为“A”。 A.3.3 方法 A.3.3.1 打开安全柜的照明灯,使安全柜在额定风速±0.025m/s(±5ft/min)运行。 A.3.3.2 将仪器加权值设定为“A”。 A.3.3.3 在安全柜前窗中心水平向外 30cm,工作台面向上 38cm 位置测量噪声水平(参见图 A-2) 。 A.3.3.4 测量环境的噪声水平时,关闭安全柜的送风机和照明灯,远程排风机应继续运行, 并按 A.3.3.3 项进行测量。 A.3.4 合格标准 在环境噪声不超过 57dB(A)级的情况下,安全柜前方的总噪声水平不应超过 7OdB(A)。 当周围环境噪声超过 57dB(A)时,按附录 A 中 A.3.3.3R 测得的读数应当根据声测仪操作手 册中所提供的曲线或表格进行修正。 如果操作手册没有提供修正资料, 则使用标准的校正曲 线 噪声读数修正表 噪声测量值与背景噪声 间的差值/dB(A) 0~2 3 4~5 扣除背景噪声值 3 2 从测量值中减去的数值 噪声测量值与背景噪声 间的差值/dB(A) 6~10 >10 1 0 从测量值中减去的数值 A.4 照明强度测试 A.4.1 目的 测定安全柜工作台面的照明强度,单位为 h,帮助减少安全柜操作人员的疲劳。 A.4.2 仪器 精确度为±10%的便携式光度计。使用前应按照说明进行标定。 A.4.3 方法 A.4.3.1 关闭安全柜的照明灯,沿着工作台中央纵轴测量背景光强度,起始测量点离一侧 15cm,然后以大约 30cm 的相等间距逐点测定(见图 A-3)。 A.4.3.2 打开照明灯和送风机,再在相同点读取数据。 图 A-3 光强度测试 A.4.4 合格标准 背景光平均强度不大于 160lx 情况下,平均照明强度应不低于 480lx。 A.5 振动测试 A.5.1 目的 测定安全柜运行时的机械振动量, 有助于设法减少操作人员的疲劳, 防止损坏组织培养 物等脆弱的试验材料。 A.5.2 仪器 振幅达到微米量级的振动分析仪。 A.5.3 方法 A.5.3.1 打开安全柜的照明灯,并使安全柜在额定风速±0.025m/s 内运行。 A.5.3.2 测定垂直轴的震动位移时, 可使用适当工具将震动测试仪的传感器元件固定在工作 台面的几何中心点。测试位置见图 A-4。 图 A-4 振动测试 A.5.3.3 测定安全柜运行时的总振幅。 A.5.3.4 关闭安全柜的送风机,仅运行排风机,测定背景振幅。 A.5.3.5 安全柜总振幅减去背景振幅即得到安全柜净振幅。 A.5.4 合格标准 安全柜正常运行条件下,工作台面中央振动频率在 10~10000Hz 时,净振幅应≤50?m 均方根振幅。 A.6 温升测试 A.6.1 目的 测定安全柜运行一段时间后柜内温度上升幅度。应在环境温度 19~28℃的房间内进行 试验。 A.6.2 仪器 2 个温度汁:精密度为 0.1℃。 A.6.3 方法 将一个温度计安装在操作台面中心上方 30cm 的位置上,测量安全柜内的温度。同时用 另一个温度计测量房间内的温度。 启动送风机、 点亮照明灯, 使安全柜在额定风速±0.025m/s 内运行。记录 4h 以后的两个温差。 A.6.4 合格标准 生物安全柜正常运行 4h 后,柜内与环境的温度差应小于 8℃。 A.7 人员、样品和交叉污染保护测试验证 微生物学 人员、样品和交叉污染保护测试验证(微生物学 微生物学) A.7.1 目的 以生物学方法测试生物安全柜对人员、产品、交叉污染保护性能,接受下述检测的生物 安全柜送风机、排风机均应以额定转速运行,并在整个测试期间持续稳定运行。 ④级生物安全柜不提供产品保护,工作面气流为乱流,只进行人员保护试验一项检测; Ⅱ级生物安全柜需进行人员、样品、交叉污染保护三项检测;Ⅲ级安全柜前部封闭,工作面 气流为乱流,不需要进行人员、样品保护和交叉污染保护试验。 A.7.2 材料和仪器、设备 材料和仪器、 A.7.2.1 黏质沙雷菌(Serratia marcescens ATCC.8039)菌悬液的配置 黏质沙雷菌( 菌悬液的配置 第 1 步 高浓度的磷酸盐缓冲液(PDB) 34g 磷酸二氢钾(KH2P04)溶于 500ml 蒸馏水中;在 25℃(77°F)下用 1mo/L NaOH 调溶液 pH 值至 7.2±0.5;用蒸馏水稀释至 1L。 第 2 步 最终的 PBS 稀释液 蒸馏水 1L(1L 蒸馏水在 25℃调 pH 值至 7.0±0.1,在 120℃高压灭菌 15min) ; 第 1 步的高浓度 PBS 溶液 1.25ml; 最终 pH 至 7.2±0.5; 120℃(250°F)高压灭菌 15min。 第 3 步黏质沙雷菌(Serratia marcescens)菌悬液的制备 在无菌条件下将黏质沙雷菌菌种划线接种到普通琼脂培养基平皿(100mm×15mm)上。 (35±0.5)℃培养(24±2)h。 在无菌条件下从特征性菌落表面上挑取一接种环细菌转移到装有 5ml 肉汤液体培养基 的试管中。 (37±0.5)℃摇床(160r/min)培养(48±2)h。 4℃保存。使用前用平皿稀释计数法确定菌液浓度。 用第 2 步配置的 PBS 稀释液稀释黏质沙雷菌菌液,使其平均浓度为 1.0×10-8/mI。 用 PBS 稀释液稀释后黏质沙雷菌菌悬液即可应用。 注:黏质沙雷菌菌落为玫瑰红色,微凸,光滑湿润,边缘整齐。 A.7.2.2 指示微生物也可以选用耻垢分枝杆菌 指示微生物也可以选用耻垢分枝杆菌(M.Smegmatis ATCC.19420)噬菌体悬液的制 噬菌体悬液的制 备和使用方法。 备和使用方法。 第 1 步 宿主菌菌液的制备 将在改良 L-J 培养基上生长 1 周的耻垢分枝杆菌接种于 7H9 另加 10%OADC+1mmol/L ( CaCl2)液体培养基,37℃ 150r/min 振荡培养 48h,菌液麦氏比浊法应为 5mg/mL,4℃保存 备用。 第 2 步分枝杆菌噬菌体的增殖 采用半固体双层琼脂平皿法。下层用含 1.5%琼脂的 7H9(50℃时加 10%小牛血清 +1mmol/L CaCl2)7ml 铺皿;上层培养基 4mL(琼脂含量 0.7%) ,在 50℃时加入耻垢分枝杆 菌和噬菌体混合悬液 0.4ml(1:1 混合) ,铺皿,37℃培养 48h,加入 9ml SM 液 37℃孵 1l 小时, 吸取液体, 0.2?m 滤膜过滤, 用 所得扩增液效价检查应为 1.0×108~1.0×109pfu/ml, 4℃ 保存(如效价不足,可重复增殖数次) 。 第 3 步指示平板的制备和使用 双层平皿法。下层铺皿方式同第 2 步,放入采样器中进行噬菌体采样后取出,在无菌条 件下倒入 48℃混有 1ml 宿主菌的上层琼脂 4ml。放在台面上摇匀。使上层培养基铺满乎板。 待凝固后,37℃培养 24h,计数噬菌斑。 A.7.2.3 气溶胶发生和采样仪器、设备 气溶胶发生和采样仪器、 空气压缩机、气体过滤装置、压力表、流量计、连接软管、支架等。 气溶胶发生器 1 个,性能见附录 B。 含营养琼脂或其他适用的生长介质,无抑制剂或其他添加剂的平皿(100mm×15mm 或 150mm×22mm) 。 6 个分别装有 20ml 无菌 PBS 稀释液的 AGI-30 型冲击式空气采样器 (流量校准到 12.3~ 12.6L/min)。 2 个额定流量为(28.3±0.2)L/min 的安德森 2 级空气微生物采样器。 一个外径 63mm、末端密闭的不锈钢、铝质或有机玻璃圆筒模拟操作者手臂干扰气流。 长度由安全柜内部的空间大小决定。 管子的一端顶在工作区域的后壁, 另一端经由安全柜操 作口凸入实验室至少 15cm。 计时器 1 个。 操作人员个人防护用具,防护服、口罩、防护镜等。 A.7.3 人员保护测试 用 1.0×108~8.0×108 的黏质沙雷菌攻击 5min。(Ⅲ级生物安全柜不需作此项测试) A.7.3.1 方法 ①开启安全柜待其风机达到额定风速。 ②用软管连接空气压缩机、气体过滤装置、压力计、流量计、气溶胶发生器。将装备的 黏质沙雷菌悬液放入冰浴槽中, 连接到气溶胶发生器上。 气溶胶发生器放置于安全柜左右内 壁中央,喷口位于工作台面上方 35cm 处,喷射轴平行于工作面。喷口距观察窗 100mm,朝 向观察窗(见图 A-5)。 图 A-5 人员安全性试验正面视图 ③将一个模拟手臂的金属圆筒置于安全柜中央,圆筒的中心轴位于工作台面上方 70mm。圆筒的一端紧靠安全柜的后壁,另——端应伸出安全柜外 150mm 以上。围绕圆筒 放置 4 个撞击采样器,采样口均位于安全柜观察窗向外 63cm 处。其中两个采样器的采样口 轴线cm,位于圆筒顶缘水平切面。另外两个采样器的采样口轴线cm,位于 圆筒底部下方 3cm 的水平面。一个有支撑架的琼脂培养皿放在圆筒中心轴下方,前进风格 栅上方或下方 10mm 处,使其对进入气流干扰最小,作为阳性对照。(见图 A-6~图 A-8。) 图 A-6 人员安全性试验侧面视图 ④放置 2 个裂隙式空气采样器,采样口水平面与工作台面持平,垂直轴在安全柜前 15cm、同侧壁 20cm 处。另放置两个撞击式采样器,采样口位于工作台面上方 36cm,安全 柜观察窗外侧 5.0cm、安全柜中线) 。 ⑤测试时间为 30min,测试顺序为:重复进行 3 次测试。 时间/min 0 5 6 操作 启动安德森 2 级空气微生物采样器 启动喷雾器 启动 AGI-30 型冲击式空气采样器 时间/min 11 11.5 30 操作 关闭 AGI-30 型冲击式空气采样器 关闭喷雾器 关闭安德森 2 级空气微生物采样器 ⑥用直径 47.0mm、孔径 0.22?m 微孔滤膜过滤撞击式采样器中的所有采样液,无菌条 件下将滤膜转移有普通琼脂平皿中。含有滤膜的平皿和取自裂隙式空气采样器的平皿在 37.0℃培养,24~28h 观察结果。 ⑦生物安全柜进行型式检验时应当在下述条件下重复上面检测步骤。 吸入口风速偏离标准风速 (-0.05±0.015) 下送风风速偏离标准风速(+0.05±0.015)m/s; m/s, 吸入口风速偏离标准风速(-0.05±0.01)m/s,下送风风速偏离标准风速(-0.05±0.01)m/s。 ⑧试验结束后对安全柜内表面进行擦拭消毒。 A.7.4 样品保护测试方法 样品保护测试方法(Ⅰ级和Ⅲ级生物安全柜不需作此项测试。 ) ①开启安全柜待其风机达到额定风速,安全柜前开口开启至生产商设定的最大高度。 ②在工作台面上满布 100mm×15mm 琼脂平皿,然后依次打开培养皿盖子。 ③用软管连接空气压缩机、滤油装置、压力计、流量计、气溶胶发生器。将黏质沙雷菌 悬液用 PBS 稀释液稀释 100 倍后,冰浴放置,连接到气溶胶发生器上。气溶胶发生器放置 于安全柜的水平中心,其水平喷射轴应与前操作开口的上边缘平齐,且平行于工作面。气溶 胶发生器的喷嘴应置于观察窗外侧 100mm 处,并朝向观察窗。 ④将一个两端密封、 外径为 6.3cm 的模拟手臂金属圆筒置于安全柜中央。 中心轴位于工 作台面向上 70mm 处。 圆筒的一端紧靠安全柜的后壁, 另一端应伸出安全柜外至少 150mm(见 图 A-9~图 A-11)。 图 A-9 受试样品保护试验培养皿摆放位置平面图 ⑤作为阳性对照, 将一个有支撑架的琼脂培养皿放在安全柜内圆筒中心轴下方, 且位于 前进风格栅上方或下方 10mm,使其对进入隔栅的气流干扰最小。 ⑥启动气溶胶发生器 min 后停止喷雾。气溶胶发生器停止后再等待 5min,然后迅速盖 好琼脂平皿。 ⑦试验结束后对安全柜内各表面进行擦拭消毒。 ⑧在 37.0℃培养,24~28h 观察结果。 ⑨对于新产品或经过重大改型设计的生物安全柜在下述条件下按 7.9 和 7.10 的程序分别 重复进行试验: 吸入口风速偏离标准风速(-0.05±0.015)m/s,送风风速偏离标准风速(+0.05±0.015)m/s; 吸入口风速偏离标准风速(-0.05±0.015)m/s,送风风速偏离标准风速(-0.05±0.015)m/s。 A.7.4.2 合格标准 每次试验中, 琼脂平皿上黏质沙雷菌的菌落数不得超过 5 个。 对照平皿必须是阳性结果。 当对照培养皿内含有≥300 个黏质沙雷菌的菌落,称其为阳性。试验重复 3 次。 A.7.5 交叉污染测试用 1×104~8×104 的黏质沙雷菌攻击 5min(Ⅰ级和Ⅲ级生 交叉污染测试用 × ~ × 物安全柜不需作此项测试)。 A.7.5.1 方法 ①开启安全柜待其风机达到额定风速。 ②装有 55ml 黏质沙雷菌悬液(1×104~8×104/mL)的喷雾器,其水平喷射位于工作台面上 方 76~130mm 处,且平行于工作面。喷雾器的背面紧靠左(右)内壁的气流分界面,喷嘴 正对右(左)内壁。 ③将琼脂平皿按下述方法排布于工作台面(见图 A-12、图 A—13) ,然后依次打开培养 皿盖子: 在喷雾器喷嘴下方布置 2 列对照平皿; 距喷嘴一侧内壁 36cm 处布置一列平皿; 距喷嘴一侧内壁 36cm 以外位置一至两列平皿。 ④启动喷雾器,5min 之后关闭喷雾器。 ⑤试验结束后对环境内各个表面进行擦拭消毒。 ⑥把喷雾器放在安全柜内对面一侧内壁的中线,重复步骤①~⑤。 ⑦停止喷雾 15min 之后,迅速盖好琼脂平皿。在 37.0℃培养,24~28h 观察结果。如果 结果为阴性,则放回恒温箱继续培养至 44~48h 后再计数。 ⑧对于新产品或经过重大改型设计的生物安全柜在下述条件下按上述程序分别重复进 行试验: 吸入口风速偏离标准风速(-0.05±0.015)m/s,送风风速偏离标准风速(+0.05±0.015)m/s; 吸入口风速偏离标准风速(-0.05±0.01)m/s,送风风速偏离标准风速(-0.05±0.01)m/s。 A.7.5.2 合格标准 距离攻击侧壁 36cm 之内的一些琼脂平皿可以得到枯草芽孢杆菌菌落,它们用作阳性对 照。每次测试时,在大于 38cm 中心处的琼脂平皿所得到的菌落总数不得超过 2 个。在安全 柜的左侧和右侧各做 3 次重复实验。 A.8 稳定性测试 A.8.1 目的 通过施加静态力并测定安全柜的变形和偏移, 来测试生物安全柜以下几方面的结构完整 性和稳定性:抵抗外力作用造成的翻倒;抵抗外力作用造成的变形;抵抗负载造成的工作台 面偏移;倾斜时的稳定性;工作台面水平性。 A.8.2 仪器 测力计或弹簧秤,精确度为 0.1kg 千分尺; 水平仪。 A.8.3 抗翻倒试验 将安全柜的前后支架调至最高,然后固定使其不能晃动。沿任一方向,自水平位置倾斜 10°。合格的安全柜应不翻倒。 A.8.4 抗柜体变形试验 用螺栓将安全柜固定在基座或地板上, 使其不能移动。 在安全柜顶端的背面和一个侧面 水平加载 1078N (110kg)的外力(加载区域不小于 250mm×250mm,且均匀受力)。用千分尺测 量安全柜顶部正面和另一侧面边缘的偏移(见图 A-14 和图 A-15)。安全柜顶部正面和侧面边 缘向前移动的距离应小于 0.2cm。 A.8.5 工作台面抗变形试验 测量工作台面正面边缘中心点到地板的距离。然后将一个面积为 25cmX25cm、质量为 225.4N(23kg)的测试负载均匀地施加于被测生物安全柜台面中央,在载重条件下测量安全柜 台面前部边缘中心至地面的距离(见图 A-16)。 负载及空载条件下安全柜台面前部边缘中心至 地板的变化距离应小于 5mm。 A.8.6 抗倾斜试验 抗倾斜试验(Ⅲ级安全柜试验之前应将前面板卸下) 在安全柜前前窗操作口前沿的中心加载 1078N(110kg)的压力,测量安全柜后底部与地 面的距离(见图 A-17)。安全柜背面的底部离开地板的距离应小于 0.20cm。 图 A-17 前窗负载抗前倾试验 A. 8.7 工作台面水平性测试 (Ⅲ级安全柜试验之前应将前面板卸下 Ⅲ级安全柜试验之前应将前面板卸下) 将安全柜的前后支架调齐并固定。以 10cm 间隔等分安全柜工作台面,用水平仪在等分 格点测量,任意位点均应为水平。 A.9 下送气流速度 A.9.1 目的 测量安全柜内操作区下送气流气流速度。④级、Ⅲ级生物安全柜操作区为乱流,不进行 此项检测。测试时风机和安全柜前开口高度均应处于生产商设定的状态。 A.9.2 装置 热风速仪,精确度为指示值土 0.015m/s 或土 3%。使用前按照说明进行仪器校准。 支架(如环形支架和夹具),可准确定位气流测量头,并且不影响气流模式。 A.9.3 方法 A.9.3.1 下送气流均衡的安全柜 ①测量通过安全柜操作口上边沿上方 10cm 处水平面上的气流速度,位置设定方法:将 安全柜内非运行所必需的可卸设备(可选组件)拆除后,在距离内侧壁板及观察窗 15cm 围成 的平面矩形区域内,测量点按行、列均为 15cm 的网格布置。若去除测量边界后净尺寸不等 于 15 的整数倍, 允许修正测量点距离, 但每列至少测量 3 点, 每行至少测量了点(见图 A-18)。 ②将热风速仪测量头固定在独立式支架上,要求定位准确,并且不扰乱气流模式。报告 每一个格点的测定值以及所有测定值的平均数。 以平均数为依据确定额定风速。 测定的额定 风速应符合制造商指定的结果±0.025m/s,单个读数的变化不得超出平均速度的±20%或上 0.08m/s(取较大一种)。 图 A-18 下降气流流速测量试验 A.9.3.2 下送气流有区域差异的安全柜 在距离安全柜操作口上边沿上方 10cm 处水平面(测试高度)上,分区测量工作空间多个 位点的气流速度。 使用说明书中应标明测量区域的位置、 每个区域内测定点的数目以及位置。 在测定额定风速以前,应将非运行所必需的可卸设备(可选组件)拆除。报告每个区域中的每 个测定值以及该区域的平均值。按照安全柜使用说明,依据上述资料确定额定风速。测定的 额定风速应符合制造商指定的结果±0.025m/s,单个读数的变化不得超出相应区域平均速度 的±20%或±0.08m/s(取较大一种)。 A.10 操作口向内气流速度测试 A.10.1 目的 测量操作口向内气流的速度,以及排风速度。 A.10.2 仪器 ①直读式向内气流测量仪(DIM),精确度为测定值±3%或±0.002m。/s。 ②热风速仪,精确度为测定速度±0.015m/s 或±3%(取较大的一个)。 ③风速计探针夹具, 可将风速计探针精确定位在测量点并且不影响气流模式, 如环状夹 和钳夹都可以使用。 A.10.3 测试方法 A.10.3.1 风量计前窗流量测量法 ①用密封条带将风量计的捕获罩密封在微生物安全柜的前窗操作口中心。 捕获罩两边留 有开口区域时也要密封。 ②运行安全柜,读取风量计至少 5 次,得到相应的气体流量测量值,计算平均值,得到 流入气流的平均流量。应注意,不要影响气流通过风量计入口。 ③流入气流的平均流量(m3/s)除以前窗操作口面积(m2),为计算的流入气流平均流速 (m/s)。 ④流入气流的平均流量(m3/s)除以工作台面宽度(m)得出工作台面每单位宽度的流入量 (m2/s)。 ⑤测试报告应包括各次的实测流量、计算的平均流量、前窗操作口尺寸和面积、平均流 速、工作台面宽度、每米宽工作台面的流入量和所使用的测量方法。 A.10.3.2 风速计测量法 这类方法由厂商提供并验证,需经测试机构审核。厂商的验证程序包括不少于 10 个重 复测试的结果。测试机构的认可在对这些数据审查以及成功再现测试结果的基础上进行。 (1)排气流速测量法 ①用热式风速计多点测量穿过排气过滤器面的气流流速,测量点为不大于 100mm×100mm 的格栅点,边界点距过滤器边缘约 100mm,测量面与过滤器面的距离约 100mm(见图 A-19) 。 图 A-19 排气流速测量试验 ②排气过滤器或排气口的有效开口面积应由厂商确定和提供, 并经测试机构确认。 对于 安全柜的排气过滤器不易拆卸、排气口不均匀,则应按测试机构核准的方法进行检测。 ③计算各测点排气流速平均值即平均排气度率(m/s),平均排气度率乘以排气面积(m2), 得到排气流量(m3/s)。 ④排气流量(m3/s)除以前窗操作口面积(m2),得到平均流入气流流速(m/s)。 ⑤测试报告应包括各测量点实测排气流速、平均排气流速、排气口尺寸和面积、排气流 量、前窗操作口尺寸和面积、流入气流流速和所用的测定方法。 (2)前窗操作口流入气流流速 ①用风速计在前窗操作口平面的两排点测量气流流速,第一排在前窗操作口上沿下约 25%开口高度位置;第二排在前窗操作口上沿下约 75%开口高度位置(见图 A-20)。 图 A-20 流入气流流速测量试验 ②测量点间隔 100mm,距前窗操作口的侧边不少于 100mm,用所有测量值的平均值表 示流入气流流速。 测试报告包括各测点流入气流流速实测值、平均流入流速以及测定所用的方法。 (3)B2 型安全柜流入气流流速的测定 ①打开安全柜垂直下送气流吹风机和排气系统吹风机。 ②将窗框(观察窗)按厂商建议的操作高度设定。 ③测定和计算排气体积。可按照测试机构验证的方法,或气流流速测定的国标。 ④ 在 下 降 气 流 扩 散 器 下 方 150mm 水 平 面 , 起 始 点 距 各 侧 壁 50mm , 对 大 约 100mm×100mm 栅格点测定供给气流流速,气流测定探针应牢固地夹持在一独立夹具(环夹 或夹钳)上,此夹具可精确的定位,且不影响气流模式(见图 A-21) 。将气流流速测量值平 均,并且乘以测定速率的平面面积(m2),得出过滤空气供给的总数(m3/s)。 图 A-21 B2 型安全柜经过滤的供气量测量试验 ⑤将供给空气的体积速率(m3/s)从总排气体积速率中减去,此差值表示所计算的流入体 积速率(m3/s)。 ⑥用开口的面积(m2)除计算所得的流入空气的体积速率,得平均流入速率(m/s)。 ⑦报告资料应包括各个排气流速实测值、计算出的平均排气流速、排气输送管面积、计 算出的排气体积、 各个供气流速实测值、 平均供气流速、 有效供气面积、 计算出的供气体积、 工作开口面积算出的流入空气体积、计算出的开口平均流入速率,以及测定所用的方法。 A.10.3.3 Ⅲ级安全柜手套连接口气流流速测量 开放安全柜的一个手套连接口,用热式风速计在连接口中心测量气流流速,至少测量 1min。在另一连接口进行重复测量。 A.10.4 合格标准 A.10.4.1 ④级和ⅡA1 型生物安全柜操作口向内气流速度应大于 0.4m/s。 A.10.4.2 ⅡB1、ⅡB2 和ⅡA2 型生物安全柜操作口向内气流速度应大于 0.5m/s。 A.10.4.3 Ⅲ级生物安全柜当一只手套脱落时,开口处的向内气流速度应大于 0.7m/s。 A.11 烟雾流型测试 A.11.1 目的 通过目视观察烟雾的流动状态,检验安全柜内气流模式。 A.11.2 仪器 烟雾发生装置及烟雾剂,提供可视烟雾。 A.11.3 实验方法 测试前使生物安全柜以正常状态运行,前窗开启高度为生产商规定的最大值。 A.11.3.1 下降气流模式测试 烟雾沿着工作表面的中心线,在前窗操作口顶端以上 100mm 的高度,从安全柜的一端 到另一端。 A.11.3.2 观察屏保留测试 烟在观察屏后 25mm、前窗操作口顶端以上 150mm 高度从安全柜的一端到另一端。 A.11.3.3 前窗操作口边缘测试 烟在安全柜外大约 38mm 处沿着整个前窗操作口的周界经过,特别应注意角落和垂直 边缘。 A.11.3.4 上下滑动窗密闭性测试 烟在滑动窗内从距安全柜侧壁 50mm 处沿工作区上沿经过。 A.12 排水槽渗漏测试 A.12.1 目的 确定工作台面下方排水槽的防渗漏性能。 A.12.2 方法 向排水槽注入 4L 的水并保持 1h,1h 后目视检查是否有明显的漏水现象。 A.12.3 合格标准 排水槽应能容纳 4L 水,并在盛放 1h 后没有明显的漏水现象。 A.13 电机/风机性能 电机/ A.13.1 目的 该试验用于证实电机/风机可以在符合 7.14 的静态压力要求下正常运行。 A.13.2 装置 热风速仪,精确度为测定速度±0.015m/s 或±3%(取较大的—个)。使用前按照说明进行 仪器校准。 套管。 压力计,精确度为检测值±2%。 A.13.3 方法及合格标准 ①将安全柜设定在额定风速±0.015m/s 状态下运行。 ②测量总的送风流量(m3/s),安全柜的送风体积按 A.10 的方法确定。 ③生产厂家应在柜上安装正压测量接头和负压测量接头。正压测量接头安装在下送风 HEPA 滤器上方,但不可正对送风机出口。负压测量接头安装在送风机吸风口前,距离吸风 口至少 1.5 倍其直径的位置。将压力计与压力测量接头相连,并记录测得的初始正压和负压 值。 ④通过减小安全柜下送气流(即堵住部分工级和ⅡA1、ⅡB1、ⅡA2 型安全柜的前格栅 或ⅡB2 和Ⅲ级安全柜的送风入口),使安全柜负压增幅达到初始正压值的 50%左右。 ⑤测量安全柜风机在限制运行时的送风总流量(m3/s)(见 A.10) 。 ⑥合格的安全柜在不控制风机转数情况下,总气流流量(m3/s)的减小不应超过 10%。 A.14 压差 A.14.1 概述 检测各种类型的生物安全柜柜体内外压力差是否符合性能要求。 A.14.2 装置 压力计 2 个,精确度为检测值±2%。 A.14.3 方法及合格条件 ①将一个压力计置于安全柜操作台面中央,另一个置于室内。 ②将安全柜设定在额定风速±0.015m/s 下运行。 ③待安全柜运行状态稳定,测量柜内压力值。同时记录室内压力,计算两者之差。 ④④级、Ⅱ级和Ⅲ级生物安全柜柜体的操作区相对于实验室均应为负压。 ⑤Ⅲ级生物安全柜柜体内与环境的压差应大于-127Pa。 A.15 电气安全测试 A.15.1 概述 电气安全应符合 GB4793.1-1995 的标准。 A.15.2 装置 万用表。 A.15.3 方法及合格标准 ①接触电流。 GB4793.1-1995 接触电流和保护导体电流的测量方法进行试验, 按 可触及 表面的泄漏电流应小于 50mA。 ②接地电阻。被测生物安全柜所有的功能开关均置于“断”位,用万用表测量电源插头 “地”插销与可触及件之间的电阻,可触及金属表面与电源插头“地”插销间的电阻值应小于 0.15 。 ③耐电压。被测生物安全柜电源输入端各极插销与箱体接地端之间应能承受 50Hz 正弦 电压 1500V,有效值工频电压持续 1min,应无击穿和闪络现象。 生物安全柜 现场测试 D.1 现场认证目的和频率 为确保安全柜符合规定的运行标准, 每台安全柜初次安装时都应进行现场测试, 并且此 后每年应进行至少一次。此外,更换 HEPA 过滤器、内部组件保养维修以及重新安放后,都 应进行重新认证。进行特殊危害性工作时,应加大安全柜再认证的频度。符合现场测试标准 的安全柜应粘贴性能良好的标志。 D.2 物理防护 即个人或环境保护 和样品保护的相关测试 物理防护(即个人或环境保护 即个人或环境保护)和样品保护的相关测试 现场应进行下列物理测试: 下送气流速度测试; 操作口向内气流速度测试; 烟雾流型测试; HEPA 过滤器渗漏测试; 安全柜完整性测试(仅针对工级和ⅡAl 型安全柜); 现场安装评价测试(包括报警功能、风机互锁功能、排风系统性能测试) D.3 人员舒适性和安全性的相关测试 进行过微生物操作的生物安全柜, 在修理或更换位于污染区的部件之前, 或在安全柜重 新安放之前,以及重新进行认证以前,均应先净化除污。进行过毒性化学物质或放射性物质 操作的生物安全柜,在清除化学污染时应穿着防护服并采用安全操作程序。 下列测试关系操作人员的舒适和安全性, 这些测试在用户要求时进行, 或由认证提供机 构决定:照度测试;振动测试;噪声水平测试;漏电、接地电阻和极性测试。 D.4 生物学检测验证 新安装或更换高效空气粒子过滤器后, 必须进行生物学检测验证。 如果实验室工作有分 工,那么从事细菌、真菌和寄生虫工作的,用黏质沙雷菌进行生物学检测验证;从事病毒工 作的,应用耻垢分枝杆菌噬菌体进行生物学检测验证。生物学检测验证包括以下三方面: 人员保护试验; 受试样品保护试验; 受试样品交叉污染保护试验。 D.5 现场安装评估测试 D.5.1 目的 验证生物安全柜在实验室中的安装是否正确,能否达到正常工:作时的性能要求。按生 物安全柜操作手册进行。 D.5.2 测试内容 D.5.2.1 报警功能 (1)气流报警器(建筑物自动化系统除外) ①使用报警器 监测气流状况时,每一次安全柜认证时,都要对报警器性能进行验证。 ②按照操作手册的步骤进行。安全柜设定于合适的气流范围内,则当排风量减少 20% 时,要求声光警报器应能在 15s 内报警指示。 (2) 观察窗报警器 将观察窗提升到生产商推荐高度上方 2.5cm 处。 检测是否有声音报 警信号。 D.5.2.2 风机互锁功能 ⅡB2 型安全柜使用风机互锁: ① 在验证报警器时进行互锁测试; ② 一旦安全柜设定于合适的气流范围内,减少 20%排风量,验证声光警报器能否在 15s 内报警。在报警器被激活的同时,安全柜内置风机应互锁关闭。 D.5.2.3 排风罩性能 使用可视烟源检验排风罩连接间隙的负压性。 烟雾一旦进入排风系统, 应不能逸出进入 房间。对于硬管连接式的排风系统,应测量位于柜体和排风管风阀之间位置的静压力。 D.6 现场测试记录 附录 F 列出了现场安装后的检测项目,测试指标均合格的生物安全柜的性能要求,除 非使用者另有指定,应在生物安全柜正面易于看到的部位张贴下列信息: ——认证测试日期; ——重新认证期限()之前; ——测试项目及结果; ——认证测试机构的名称、地址、电话号码; ——检测者签名。 附录 F 生物安全柜 检测项目 检验项目表格 序号 l 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 检验项目 外观检验 箱体检漏 排风高效过滤器检漏 送风高效过滤器检漏 噪声 照度 振动幅值 温升 人员安全性 受试样本安全性 交叉污染 抗翻倒 抗变形 工作台面抗偏移 工作台面水平性 下送气流速度 操作口向内气流速度 烟雾流型 排水槽渗漏性 电机/风机性能 压差 接触电流 接地电阻 耐电压 试验方法 Ⅸ5.1.1 附录 A.1 附录 A.2 附录 A.2 附录 A.3 附录 A.4 附录 A.5 附录 A.6 附录 A.7 附录 A.7 附录 A.7 附录 A.8 附录 A.8 附录 A.8 附录 A.8 附录 A.9 附录 A.10 附录 A.11 附录 A.12 附录 A.13 附录 A.14 附录 A.15 附录 A.15 附录 A.15 型式检验 √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ 出厂检验 √ √ √ √ √ √ √ √ —— —— —— —— —— —— √ √ √ √ —— —— —— —— —— √ 安装测试 √ √ √ √ √ √ √ √ —— —— —— √ √ √ √ √ √ √ √ —— —— √ √ √ 注:表中有“√”者表示在该检验中应检验的项目 E.14 氨浓度的检测 1 范围 本标准规定了公共场所空气中氨浓度的测定方法。 本标准适用于公共场所空气中氨浓度的测定,也适用于居住区大气和室内空气中氨浓 度的测定。 第一法 靛酚蓝分光光度法 2 原理 空气中氨吸收在稀硫酸中,在亚硝基铁氰化钠及次氯酸钠存在下,与水杨酸生成蓝绿 色的靛酚蓝染料,根据着色深浅,比色定量。 3 试剂和材料 本法所用的试剂均为分析纯,水为无氨蒸馏水[制备方法见附录 A]。 3.1 吸收液[c(H2SO4)=0.005]: 量取 2.8mL 浓硫酸加入水中,并稀释至 1L。临用时再稀释 10 倍。 3.2 水杨酸溶液(50g/L):称取 10.0 g 水杨酸[C6H4(OH)COOH]和 10g 柠檬酸钠(Na3C6O7·2H2O 加水约 50mL,再加 55 mL 氢氧化钠溶液[c(NaOH)=2mol/L],用水稀释至 200 mL。此试剂 稍有黄色,室温下可稳定一个月。 3.3 亚硝基铁氰化钠溶液 10g/L):称取 1.0g 亚硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5·2H2O],溶于 100mL 水中。贮于冰箱中可稳定一个月。 3.4 次氯酸钠溶液[c(NaClO)]=0. 05 mo1/L]:取 1 ml 次氯酸钠试剂原液,用碘量法标定其浓 度(标定方法见附录 B) 。然后用氢氧化钠溶液[c(NaOH)=2mol/L]稀释成 0.05mol/L 的溶液。 贮于冰箱中可保存两个月。 3.5 氨标准溶液 3.5.1 标准贮备液:称取 0.3142g 经 105℃干燥 1h 的氯化铵(NH4Cl) ,用少量水溶解,移人 100 mL 容量瓶中,用吸收液(3F 稀释至刻度。此液 1.00mL 含 1.00mg 氨。 3.5.2 标准工作液:临用时,将标准贮备液(3.5.1)用吸收液稀释成 1.00mL.含 1.00?g 氨。 4 仪器、设备 仪器、 4.1 大型气泡吸收管:有 10mL 刻度线mm,与管底距离应为 3~ 5mm。 4.2 空气采样器:流量范围 0~2L/min,流量稳定。使用前后,用皂膜流量计校准采样系统 的流量,误差应小于士 5%。 4.3 具塞比色管:10ml。 4.4 分光光度计:可测波长为 697.5nm,狭缝小于 20nm。 5 采样 用一个内装 10mL 吸收液的大型气泡吸收管,以 0.5L/min 流量,采气 5L,及时记录采 样点的温度及大气压力。采样后,样品在室温下保存,于 24h 内分析。 6 分析步骤 6.1 标准曲线 制备标准系列管。 在各管中加人 0.50mL 水杨酸溶液(3.2),再加人 0.10mL 亚硝基铁氰化钠溶液(3.3)和 0.10ml 次氯酸钠溶液(3.4),混匀,室温下放置 1h。用 1cm 比色皿,于波长 697.5nm 处,以 水作参比,测定各管溶液的吸光度。以氨含量(n)作横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲 线,并用最小二乘法计算校准曲线的斜率、截距及回归方程(1)。 Y=bX+a······························……(1) 式中:Y-标准溶液的吸光度; X-氨含量,F1g; a-回归方程式的截距; b-回归方程式斜率 标准曲线 吸光度/?g 氨。以斜率的倒数作为样品测定时的计 算因子(Bs) 6.2 样品测定 将样品溶液转人具塞比色管中,用少量的水洗吸收管,合并,使总体积为 10mL。再按 制备标准曲线)测定样品的吸光度。在每批样品测定的同时,用 10mL 未采样 的吸收液作试剂空白测。 如果样品溶液吸光度超过标准曲线范围, 则可用试剂空白稀释样品 显色液后再分析。计算样品浓度,要考虑样品溶液的稀释倍数。 7 结果计算 7.1 将采样体积按式(2)换算成标准状态下的采样体积: 式中:V0-标准状态下的采样体积,L; Vt-采样体积,由采样流量乘以采样时间而得,L; T0-标准状态下的绝对温度,273K; P0-标准状态下的大气压力,101.3kPa; t-采样时的大气压力,kPa; t-采样时的空气温度,℃。 7.2 空气中氨浓度按式(3)计算: 式中:c-空气中氨浓度,mg/m3; A-样品溶液的吸光度; A0-空白溶液的吸光度; B-计算因子,?g/吸光度; V0-标准状态下的采样体积,L。 8 测定范围、精密度的准确度 测定范围、 8.1 测定范围 测定范围为 10ml 样品溶液中含。0.5~10?g 氨。按本法规定的条件采样 10min,样品可 测浓度范围为 0.01~2mg/m3。 8.2 灵敏度 10ml 吸收液中含有 1?g 的氨,吸光度为 0.081 士 0.003。 8.3 检测下限 检测下限为 0.5?g/10ml.,若采样体积为 5L 时,最低检出浓度为 0.01mg/m3。 8.4 干扰和排除 对已知的各种干扰物, 本法已采取有效措施进行排除, 常见的 Ca2+、Mg2+、Fe3+、Mn2+、 Al3+等多种阳离子已被柠檬酸络合;2?g 以上的苯氨有干扰,H2S 允许量为 30?g。 8.5 方法的精密度 当样品中氨含量为 1.0,5.0,10.0?g/10mL 时,其变异系数分别为 3.1%,2.9%,1.0%, 平均相对偏差为 2.5%。 8.6 方法的准确度 样品溶液加人 1.0, 5.0, 3.0, 7.0?g 的氨时, 其回收率为 950o-1090,, 平均回收率为 100.0%。